單細(xì)胞高通量液滴測(cè)序Drop-seq技術(shù)是一種可快速分析數(shù)千個(gè)單細(xì)胞的方法,可將每個(gè)細(xì)胞包裹在納升級(jí)的微滴中,通過(guò)操作液滴微流控,可近一步的促使RNA雜交并生成mRNA轉(zhuǎn)錄物,可進(jìn)一步的分析細(xì)胞基因表達(dá)譜的轉(zhuǎn)錄和制作mRNA轉(zhuǎn)錄物的起源細(xì)胞。
液滴微流控Drop-Seq它的應(yīng)用遠(yuǎn)不止可以識(shí)別單細(xì)胞的形態(tài)類型。目前,基因組遺傳學(xué)研究正在研究和識(shí)別許多導(dǎo)致疾病風(fēng)險(xiǎn)的基因分子細(xì)胞生物,但生物學(xué)缺乏類似于液滴測(cè)序的高通量基因識(shí)別方法。另外,液滴測(cè)序與突變、病原體刺激等微擾動(dòng)相結(jié)合,可以豐富多維的解讀各種細(xì)胞,揭示微擾動(dòng)對(duì)單細(xì)胞生物的影響。
Drop-seq是基于液滴微流控技術(shù),其可將細(xì)胞懸浮液與帶分子條形碼的微珠懸浮液泵至微流控芯片,使其聚合并產(chǎn)生層流,隨后與油聚合,產(chǎn)生單分散式的微滴;可將每一個(gè)細(xì)胞與一個(gè)微珠一起單獨(dú)包裝在同一微滴中,隨后可進(jìn)行對(duì)細(xì)胞RNA的雜交并裂解微滴,釋放出MRNA的雜交,進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄;再以PCR方式進(jìn)行核酸酸擴(kuò)增,并可開展測(cè)序分析。